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植物细胞核提取试剂盒(非酶法)图片
产品货号:
HR7810
中文名称:
植物细胞核提取试剂盒(非酶法)
英文名称:
Plant cell nuclear extraction kit
产品规格:
50T|100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
植物细胞核提取试剂盒适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取细胞核。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的核不仅纯度高。

本试剂盒提取的细胞核保持天然活性,可以用于功能研究等各种下游,也可以用于提取核蛋白。

本试剂盒适合新鲜样本的细胞核提取,冻存样品由于核可能已经损伤破裂,回收率会降低。

本试剂盒采用非酶法提取,提取过程简单方便,速度快,可在1小时内完成,而且绝少交叉污染,但是细胞核回收率相比酶法较低。酶法提取制备的植物细胞核,回收率稍有提高,但是耗时较长。如果需要更加快捷的提取试剂盒,可以选择非酶法的提取试剂盒,对提取速度没有要求的话,可以选择酶法提取试剂盒。

产品组成:
组份50T100T
试剂A:植物核提取液A100mL200mL
试剂B:植物核提取液B25mL50mL
试剂C:植物核保存液C15mL30mL

储存条件:2~8℃保存。有效期1年。

自备器材:
  • 移液器
  • 离心机
  • 振荡器
  • 匀浆机/匀浆器
  • 涡旋混匀器
  • PBS缓冲液
  • 细胞筛(100μm)


注意事项:
  • 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。
  • 实验过程中的所有试剂须预冷;所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
  • 正式实验前请选取几个样本做预实验,以优化实验条件,取得最佳实验结果。
  • 禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
  • 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
  • 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
  • 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。


使用方法:
  • 取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的500mg左右(200mg~500mg均可)的新鲜植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。
  • 加入1mL提取液A用匀浆机充分匀浆。或者加适量提取液A后用Dounce匀浆器充分匀浆。
    ● 匀浆尽可能充分,至无明显可见固体。
    ● 培养细胞直接收集细胞后用Dounce匀浆器匀浆即可,匀浆后加提取液A混匀直接进行下步骤离心。
  • 在匀浆液中加入1mL提取液A,充分混匀,然后将匀浆液用100μm细胞筛过滤。
    ● 没有细胞筛过滤条件,也可将匀浆液稍微静置,吸取上清匀浆液,丢弃大的细胞碎片、纤维等沉淀。
    ● 有些含粘液较多的样品可能难以吸取,可以将1mL吸头尖稍微减掉一点使用。
    ● 匀浆液量较少不好过滤时,可以补加PBS缓冲液后过滤。
  • 将滤液在1000×g条件下离心10分钟,弃上清,收集沉淀。
  • 在沉淀中加入500μL提取液B,充分混匀。
    ● 用Dounce匀浆器匀浆20~30下,可以提高细胞核回收率。
  • 置振荡器振荡15分钟。
    ● 用振荡器/摇床的较低转速,保持液体有轻微晃动即可。
    ● 没有低温振荡条件可以不振荡,在2~8℃静置,中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。
  • 在1000×g条件下离心10分钟。弃上清,收集沉淀。
  • 在沉淀中加入200μL冷的核保存液C,混匀。
    ● 也可不用试剂盒中的核保存液,根据下游实验需要用相应其他缓冲液保存或者直接用于下游实验。
  • 即可得到细胞核。
  • 将上述细胞核样品于-20℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
    ● 存放后需要收集细胞核使用时,在2000×g离心10分钟收集沉淀即可。

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